El servicio posee un Microscopio Láser Confocal Espectral (CLSM) Leica TCS SP5 equipado con 7 líneas de láser, AOTF (Acousto-Optic Tunable Filter), AOBS (Acousto-Optical Beam Splitter) y sistema de barrido (Tandem-scanning system SP5) para trabajo a alta resolución adecuado para material in vivo.
Las características del equipo son:
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Módulo confocal espectral basado en prisma con sistema de detección multibanda de alta sensibilidad.
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Scaneo confocal de punto- Secciones ópticas reales
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4 canales confocales de detección para reflexión y fluorescencia, de ancho de banda y longitud de onda central ajustables en continuo y de forma independiente para cada canal.
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1 canal de detección de luz transmitida.
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Resolución máxima de barrido 8.192 x 8.192 píxeles (imágenes de hasta 16 Megapixels)
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Velocidad máxima de barrido de 8.000 líneas por segundo.
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Líneas de Láser de Excitación :
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Láser |
Línea de Excitación |
Colorantes, sondas y proteínas fuorescentes |
| Ar 100mW | 458nm** | Alexa 458, CFP, Cerulean |
| 476nm | Wild type GFP | |
| 488nm | Alexa 488, eGFP, GFP S65T | |
| 496nm | Fluorescein, TagYFP | |
| 514nm | eYFP, Venus , Alexa 514 | |
| HeNe 1.5mW | 543nm* | TRITC, Cy3, iduro de propidio, Alexa 546 |
| HeNe 2.5mW | 594nm | Alexa 594, Texas Red, mCherry |
| HeNe 10mW | 633nm | Alexa 633, Cy5 |
*La línea de excitación de 543nm se utiliza actualmente para excitar RFP (excitación 563nm), tdTomato (excitación 554nm), DsRed (excitación 563nm), aunque su eficiencia es menor que el Láser HeNe 561nm que es el más adecuado.
**Aunque la línea de 458 excita CFP/Cerulean (excitation 436nm) la eficiencia es baja y menor que la lograda con el Láser de Diodo 405nm que es el adecuado para utilizar FRET con los pares CFP-YFP para evitar la excitación cruzada.
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Microscopio de óptica invertida, modelo Leica DMI 6000 CS motorizado.
Objetivos disponibles Magnificación/A.N. Distancia de trabajo
HC PL APO CS 10x/0.4 2.2 mm.
HC PL APO CS 20x/0.70 590 μm.
HCX PL APO CS 63x/1.4 oil 100 μm.
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Iluminación con lámpara halógena, condensador para campo claro y prismas de contraste interferencial de Nomarski. Lámpara de fluorescencia de vapor de mercurio y cubos de filtros A, GFP, I3, N2.1
Adquisición y visualización
Panel de control con 7 potenciómetros digitales para el ajuste de los parámetros de exploración en directo.
Estación de trabajo:
Software para el control de la exploración, adquisición de series multidimensionales (x,y,z), visualización, procesado bidimensional, y cuantificación de las imágenes.
Software para la reconstrucción tridimensional de imágenes.
Software para el análisis de colocalizaciones 2D y 3D.
Software para FRET (("fluorescence resonance energy transfer")
Software para FRAP ("fluorescence recovery after photobleaching").
Software de Separación Espectral
Software para LIVE DATA MODE
Ubicación
Edificio ex Liceo, Planta Baja (al lado del Aula de Conferencias)
Calle 115 y 49, 1900 La Plata
Tel (221) 425-0497
Para mayor información comunicarse a: unlp.confocal@gmail.com
para solicitar turnos hacerlo a través de SNM http://www.microscopia.mincyt.gob.ar/turnos.php
